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厭氧培養(yǎng)箱使用特點和主要事項

更新時間:2014-08-21      點擊次數(shù):3631

*步、先將培養(yǎng)操作室形成厭氧環(huán)境:

1、按使用要求在培養(yǎng)操作室內(nèi)放置除氧催化器及已封閉的培養(yǎng)皿等。500g鈀粒除氧劑(密封狀態(tài))和500克干燥劑。

2、按下電源開關(guān),關(guān)緊取樣室內(nèi)、外門,按下真空泵按鈕將取樣室抽成負(fù)壓(見真空表指針指向

0.06MPa)。

3、要將培養(yǎng)操作室內(nèi)的氧氣含量達(dá)到極微量狀態(tài),須經(jīng)三次氣體置換:(1)*次氣體置換,

純度為99.99%的氮氣。操作如下:

    把乳膠手套套在法蘭圈上并扎緊。按下箱內(nèi)氮氣進(jìn)開關(guān),氮氣即達(dá)到充足狀態(tài),再按動此開關(guān),即關(guān)閉。雙手伸入乳膠手套,并隨即踏腳踏開關(guān),氮氣即會漸漸充入培養(yǎng)室。(2)第二次氣體置換(氮氣置換),重復(fù)一次充氮過程,取樣室先抽真空,并注意隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。(3)第三次置換混合氣體,混合氣體配比為:N2↑90%、H2↑5%、CO2↑5%,純度均為99.99%。先將取樣室抽真空,至真空表指針指向0.06MPa。按下箱內(nèi)混合氣進(jìn)開關(guān),混合氣體達(dá)到充足狀態(tài),再按動此開關(guān),即關(guān)閉。按下箱內(nèi)混合氣微調(diào)開關(guān),使混合氣體按一定的流量充入培養(yǎng)室。通過三次換氣后,培養(yǎng)操作室內(nèi)氣體含氧量已處于極微量狀態(tài)。

4、培養(yǎng)操作室內(nèi)打開鈀粒除氧劑,接通除氧催化器電源進(jìn)行催化除氧。

5、用戶使用前或使用后如需操作培養(yǎng)室、取樣室滅菌,可打開內(nèi)置培養(yǎng)箱外門即取樣室內(nèi)門,后開啟控制面板殺菌開關(guān),可將操作室等進(jìn)行滅菌處理。時間長短可根據(jù)用戶實際需要自定。操作該功能注意事項詳見系統(tǒng)化“注意事項”第(7)條。

第二步、將菌種置入和培養(yǎng)

1、檢查取樣室內(nèi)門并將它關(guān)緊。

2、打開取樣室外門,將菌種放入取樣室后即關(guān)上外門。

3、完成取樣室充氮置換三次過程:打開真空泵,先抽真空至0.06MPa以上停,然后人工打開過道氮氣進(jìn)開關(guān),當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道氮氣進(jìn)開關(guān)。重復(fù)以上操作進(jìn)行第二次氮氣置換。第三次氣體置換操作時,抽真空度0.06MPa以上停,然后打開過道混合氣進(jìn)開關(guān)充進(jìn)混合氣體,當(dāng)指針回復(fù)零位后關(guān)掉過道混合氣進(jìn)開關(guān)。取樣室充氣置換三次過程結(jié)束。

4、為保證培養(yǎng)操作室厭氧環(huán)境不被破壞,選取較低真空度進(jìn)行充氮置換時應(yīng)增加置換次數(shù)。

5、開啟取樣室內(nèi)門,將菌種從取樣室移入培養(yǎng)操作室,再將取樣室內(nèi)門關(guān)緊,再抽真空檢

查內(nèi)門是否關(guān)緊。

6、如培養(yǎng)箱需要長期連續(xù)使用,則必須:(1)每天在培養(yǎng)操作室內(nèi)觀察,如發(fā)現(xiàn)不正常就必須更換氣體。(2)如用戶在操作時,由于產(chǎn)品結(jié)構(gòu)的原因,在停止供氣12小時以后,有可能存在極微量的滲漏,或培養(yǎng)所需菌種需求要求微量混合氣體的補(bǔ)充時,可經(jīng)內(nèi)置過濾器連續(xù)輸入微量的混合氣體,使補(bǔ)進(jìn)的氮氣能和微量的氧氣結(jié)合并被催化吸收,保證箱內(nèi)厭氧狀態(tài),補(bǔ)入混合氣流量為每分鐘10ml左右。(3)連續(xù)培養(yǎng)一天,更換一次除氧劑和干燥劑。

7、培養(yǎng)操作室內(nèi)溫度可在溫控范圍內(nèi)任意選擇和控制。

8、混合氣瓶,氮氣瓶輸出壓力調(diào)整:調(diào)節(jié)減壓閥,使輸出壓力為0.02Mpa左右。

注意事項及產(chǎn)品維護(hù)和保養(yǎng):

1、儀器盡可能安裝在空氣清潔,溫度變化較小的地方。

2、開機(jī)前應(yīng)全面熟悉和了解各組成配套儀器、儀表的使用說明書,掌握正確使用方法。

3、培養(yǎng)物必須在培養(yǎng)操作室達(dá)到無氧環(huán)境后放入。

4、如發(fā)生故障(停氣等原因)培養(yǎng)操作室內(nèi)仍可保持12小時厭氧狀態(tài)。(超過12小則需要把培養(yǎng)物取出另作處理)。

5、經(jīng)常注意氣路有無漏氣現(xiàn)象。

6、當(dāng)氣瓶氣體用盡,總輸出壓力小于0.1Mpa時,應(yīng)盡快調(diào)換氣瓶,調(diào)換氣瓶時注意要扎緊氣管,避免管內(nèi)流入含氧氣體。

7、殺菌燈如需開啟時,由于殺菌燈管能輻射出強(qiáng)烈的2537Å短波紫外線,對核酸蛋白質(zhì)作用特別強(qiáng)。能使細(xì)菌發(fā)生變異殺死,同時,紫外線對有機(jī)細(xì)胞具有殺傷力。人的眼睛和皮膚較長時間暴露在紫外線下會造成灼傷。所以,必須開啟時應(yīng)拿出操作室或培養(yǎng)室中的培養(yǎng)物。開啟后應(yīng)及時離開紫外線輻射之外,以免造成人體不舒,如頭痛、胸悶、暈眩等現(xiàn)象。

8、整機(jī)無電,可檢查電源插入端有無220V電源插入,如有電源可拔下插頭,檢查控制面板上熔斷器是否熔斷。如屬熔斷需有電工或電器知識的人員調(diào)換或檢修,也可垂詢生產(chǎn)廠家,請勿自行調(diào)換,以免可能發(fā)生意外和造成不需要的損失。

9、在初設(shè)氣體置換或培養(yǎng)結(jié)束釋放混合氣體時,應(yīng)打開實驗室門窗或?qū)⑼L(fēng)口打開,以加速氣體的流通。減少釋放氣體超標(biāo)吸入人體而引起不適。

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